Комедийный фильм «Ночь в музее 2» продолжает историю про оживающие по ночам экспонаты Музея естественной истории. После прошлой работы ночного сторожа в музее Ларри обзавелся своим небольшим бизнесом и продает бытовые товары для дома, рекламируя их в телемагазине. У него даже намечается крупная сделка с лидирующей в мире компанией по розничной торговле. Как-то он отправляется на свою старую работу и узнает, что музей закрыт на реконструкцию, а все экспонаты будут переданы в архив Смитсоновского института.
Во время перевозки экспонатов обезьяна Декстер крадет волшебный золотой слиток, который может оживлять все предметы вплоть до рисунков на картинах. Узнав об этом Ларри отправляется в Вашингтон на помощь своим друзьям, ведь за золотой пластиной охотиться страшный египетский фараон, чтобы открыть врата в загробный мир. В архиве начинается самая настоящая битва, повторившая ту самую ночь в музее 2.