В центре сюжета комедийного фильма «Луни Тюнз: Снова в деле» — приключениях известных и любимых мультипликационных героев: кролика Багс Банни и утки Даффи Дака. Все началось с того, что охраннику киностудии поручили вышвырнуть за ее пределы разъяренного Даффи Дака, чей рейтинг ниже рейтинга любимого всеми Багса Банни. Однако это задание приводит к тому, что охранник Ди Джей Дрейк сам лишается работы. Но это оказалось не самым худшим происшествием в жизни обоих.
Скоро друзьям по несчастью предстоит пережить множество опасных, но увлекательных приключений в поисках пропавшего отца Ди Джея — настоящего международного шпиона, которого похитил безумный суперзлодей Председатель с целью получения уникального бриллианта “Голубая обезьяна”, наделенного мифической силой.